這對于西班牙將是一個致命的打擊，所以自1558年以后的12年中，腓力都在不惜一切的成本扶助伊麗莎白，以確保其王位，好對瑪麗保持一個對抗的勢力。

        對于西班牙而言，一個友善的英格蘭具有極大的重要性，因為英格蘭的位置恰好威脅西班牙到日德蘭之間的海上交通線的側面。

        不過這一切在1560年發生了變化，法蘭西斯二世逝世，繼承者為他的兄弟查爾斯九世，并暫時由他的母親卡特琳攝政。

        1561年8月，瑪麗回到蘇格蘭，并在1567年，她在蘇格蘭暗殺了他的第二任丈夫達恩里勛爵，并于1568年逃往英格蘭避難。

        從此，她就被伊麗莎白所拘禁，以終余年。

        演變，再加上反西黨在英國的得勢，使得腓力改變了他對瑪麗的政策。

        因為瑪麗已經不再是蓋斯家族的直接工具，所以腓力現在也不再站在伊麗莎白一邊，反而利用瑪麗來當作制造反伊麗莎白陰謀的支柱。

        在這個工作上，他也受到了教皇庇護五世的支持，教皇在1570年，曾對英國女王處以破門之罪。

        英國和西班牙關系的破裂，其中還有一個因素就是經濟上的沖突。

        普利茅斯的約翰·霍金斯開始搶劫非洲的運奴商業，這本是西班牙王室的專利買賣。

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